Descrizione
Lo strumento Ensight multimode plate reader ha caratteristiche modulari e completamente up-gradabili che consentono un approccio ortogonale per lo studio delle risposte biologiche in sistemi cellulari. La configurazione base dello strumento è data dall’assorbanza a filtri con barcode ma può inoltre supportare la fluorescenza utilizzando il quadruplo monocromatore (dall’alto e dal basso), luminescenza-ultra sensibile (con detector dedicato), Time Resolved Fluorescence (TRF), Alpha technology, tecnologia Label Free Epic (tecnologia che lavora senza nessun tipo di label ma solo con piastre speciali), e imaging cellulare (fino a 4 colori in fluorescenza, campo chiaro e contrasto di fase).
Funzionalità
L'Ensight presenta un sistema di controllo della temperatura ed è inoltre dotato di uno schermo 24 pollici, per apprezzare bene le immagini, e un software di analisi, Kaleido, facile ed intuitivo che permette l'acquisizione delle immagini e l'analisi dei dati. Esso consente di studiare segnali cellulari e biochimici in tempi veloci e in modo simultaneo, nonché di valutare interazioni proteina-proteina e ligandi-proteina con metodi label free, ovvero senza l’utilizzo di traccianti. L'Ensight multimode plate reader è l’unico strumento in grado di supportare imaging e label free insieme, per dare la possibilità al ricercatore di avere la determinazione simultanea dei diversi parametri biochimici e morfologici. Lo strumento inoltre può avere un impiego multidisciplinare sia per studi biochimici cellulari e funzionali sia per lo screening e valutazione dell’attività in vitro di molecole di nuova sintesi con metodi veloci e riproducibili.
Tipo di analisi e misure disponibili
Assorbanza.Scegliendo l’adeguata lunghezza d’onda è possibile effettuare varie misurazioni tra cui le applicazioni più comuni: dosaggio proteico (es. Bradford), cristal violetto, ELISA (TMB), saggi di vitalità cellulare (MTS), Spettri di assorbimento.Fluorescenza.E’ possibile scegliere l’appropriata lunghezza d’onda di eccitazione ed emissione ed effettuare letture dall’alto o dal basso della piastra. E' possibile effettuare varie misurazioni tra cui le applicazioni più comuni: cell counting, quantificazione DNA/RNA e spettri di emissione di fluorescenza.Luminescenza Uiltra-sensibile.E’ utilizzabile quando si ha a disposizione un numero limitato di cellule (es. colture primarie e cellule staminali) per valutare vitalità e tossicità (es. cellular ATPlite) e misurazione dell’espressione genica.TRF (time resolved fluorescence).E’ utilizzabile per dosaggi biochimici e cellulari anche quando il campione è presente in bassa concentrazione grazie alla piattaforma LANCE Ultra che è sensibile e facilmente utilizzabile. Applicazioni: G Protein-Coupled Receptors (GPCRs), interazioni proteina-proteina, dosaggi enzimatici, legami recettore-ligando, chinasi, recettori endogeni, citotossicità e proliferazione cellulare, metilazione e acetilazione.Tecnologia Alpha (AlphaLISA e AlphaScreen). Permette di avere risultati in circa metà tempo rispetto ad un kit ELISA utilizzando una metodica basata su biglie. Applicazioni: dosaggio di enzimi, interazioni recettore-ligando, chinasi, secondi messengeri, DNA, RNA, proteine, proteasi, peptidi, zuccheri e piccole molecole.Tecnologia Label-free.Misura l’attività cellulare e le interazioni tra biomolecole. La tecnologia Epic misura variazioni nella rifrazione della luce che derivano dalla distribuzione dinamica di massa (DMR) che si verificano all’interno della cellula a seguito all’attivazione o inattivazione di un recettore. Applicazioni: espressione di recettori endogeni o ricombinati in colture cellulari, risposta cellulare a vari stimoli quali piccole molecole, peptidi, anticorpi o virus, tossicità cellulare, neurobiologia.Well imaging.E’ possibile effettuare cell-imaging mediante una nuova modalità di generare dati fisiologicamente rilevanti partendo da cellule fissate o in-vivo. Applicazioni: Cell counting, tossicità cellulare, migrazione cellulare, analisi di colture 3D (Sferoidi), migrazione cellulare (ORIS), misurazione dei livelli di transfezione, conteggio placche virali.
Costo
- utenti interni al Dipartimento: 60 €/ora;
- utenti di altri Dipartimenti: 60 €/ora;
- utenti di altri Enti di Ricerca pubblici: 67,50 €/ora
- utenti privati: 73,40 €/ora
Il costo orario non comprende il materiale consumabile specifico per l'analisi da effettuare che sarà a carico del singolo gruppo di ricerca che richiede l'utilizzo dello strumento.
Disponibilità
lun-ven 8.30-13.30
Richiesta disponibilità
Contatti
Responsabile: Prof.ssa Maria Letizia Trincavelli
Tecnico: Elena Donadio
Dipartimento di Farmacia - via Bonano 6
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